細(xì)胞增殖方法

細(xì)胞增殖的定義

細(xì)胞以分裂的方式進(jìn)行增殖。單細(xì)胞生物，以細(xì)胞分裂的方式產(chǎn)生新的個(gè)體。多細(xì)胞生物，以細(xì)胞分裂的方式產(chǎn)生新的細(xì) 胞，用來(lái)補(bǔ)充體內(nèi)衰老或死亡的細(xì)胞。

細(xì)胞增殖的檢測(cè)方法

1）對(duì)活細(xì)胞的代謝活性的檢測(cè)（基于MTT、CCK-8等）

2）DNA合成的檢測(cè)（基于BrdU的免疫法或EdU的點(diǎn)擊化學(xué)法），可通過(guò)體內(nèi)成像、微孔板或流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) 等多種技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞示蹤。

細(xì)胞代謝活性檢測(cè)

MTT（噻唑藍(lán)）：通過(guò)添加四咪唑鹽到細(xì)胞中可進(jìn)行線粒體內(nèi)酶代謝活性的測(cè)定。活細(xì)胞能將四咪唑鹽（如MTT、XTT、WST-1）還原成藍(lán)紫色的甲瓚或甲瓚鹽（Formazan），可通過(guò)分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)。

Cell Counting Kit–8 （CCK-8）中的WST-8被細(xì)胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的橙色甲臜染料能夠溶解在組織培養(yǎng) 基中，生成的甲臜量與活細(xì)胞數(shù)量成正比。基于CCK-8（WST-8）的試劑盒能高度準(zhǔn)確地檢測(cè)細(xì)胞增殖，比MTT法 及XTT法的靈敏度高5倍，能檢測(cè)更低的細(xì)胞數(shù)目。該試劑盒可適用于96孔板培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞。

DNA的合成的檢測(cè)

DNA的新組裝合成是細(xì)胞生長(zhǎng)的必要條件，故經(jīng)常被用來(lái)進(jìn)行細(xì)胞增殖、細(xì)胞活力及凋亡的檢測(cè)。 BrdU及EdU，都是胸腺嘧啶的非放射性類似物，能摻入增殖細(xì)胞的DNA中，可通過(guò)對(duì)BrdU及EdU的檢測(cè)，從而對(duì)DNA的合 成量進(jìn)行測(cè)定。

EdU（5-Ethynyl-2’- deoxyuridine）是一種胸腺嘧啶核苷類似物，能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶（T）滲 入正在復(fù)制的DNA分子中，通過(guò)基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性，適用于細(xì) 胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究，尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。

上海雅吉生物專業(yè)供應(yīng)各種屬細(xì)胞，原代細(xì)胞及細(xì)胞系。