4個步驟帶你拿捏流式細胞術

第一步

設計你的流式細胞實驗

很多同學在實驗設計的時候就埋下了隱患，最常見的問題就是——對照設置不合理，最后導致整體實驗失敗或數據不理想。

流式對照至少有 5 種。

生物學對照，空白對照，同型對照（Isotype control），補償對照（也叫單陽性對照）和 FMO 對照，主要目的是為了避免出現的假陽性或

假陰性結果。

第二步

細胞懸液樣本制備

流式細胞術的分析檢測建立在單個細胞的基礎上，所以制備合格的單個分散的細胞懸液是非常關鍵的一環。

對不同來源和不同形式的樣品，根據各種樣品的特點可選擇不同的分散方法。

單層培養細胞、血液、各種脫落細胞等樣品

標本經過簡單的制備懸液，離心分離處理，就可以得到分散較好的單個細胞懸液，是理想的流式細胞術檢測對象。

不同組織來源的實體組織標本

采用酶消化法、機械法和化學試劑處理法來分散細胞。

石蠟包埋組織單細胞懸液

可使大量存檔的臨床資料重新得到研究與利用，從而擴大了流式細胞術的應用范圍。樣品制備一般通過切片、脫脂、水化、消化及終止消化后過濾再收集細胞懸液，去除碎片的單細胞懸液用 70％ 乙醇固定保存。

第三步

流式檢測操作流程

很多同學第一次操作流式細胞儀器的時候非常緊張，生怕哪一步做錯，弄壞了上百萬的實驗設備。儀器的操作確實有很多講究，比如：

「檢查供液槽和廢液槽：供液槽應含足夠的儀器緩沖液，廢液槽應在上次使用后清洗干凈。

第四步

流式檢測結果分析

實驗結果圖通常有一維直方圖、二維點圖、等高線圖、密度圖等幾種。