細胞培養中的“小黑點”出現常見原因

細胞培養中的“小黑點"是什么？

經常培養細胞的同學們，可能都遇到過上圖的情況，突然有一天，顯微鏡下發現培養基里有為數不少的“小黑點"，它們有些知識隨著液體晃動，有些會自主地在液體里迅速或者緩慢地游動。

這些“小黑點"，也會被我們的客戶形象地稱為“有黑色的蟲子"。那這些“小黑桿"到底是什么呢？

出現“小黑點"最常見的可能

各類細菌

細菌污染是實驗室細胞培養中常見的污染，即使在細胞培養液中加入了抗菌素，也可能因為操作不慎而引起污染。常見的有革蘭氏陽性菌，如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌。其中，不乏各類桿狀細菌，在顯微鏡下這些桿菌看起來就像“小黑點"一樣。

培養細胞受細菌污染后，初期細胞仍能生長，但隨著細菌的迅速增殖，會出現培養液變混濁，pH改變從而導致培養基顏色發生變化。隨著污染的加重，細胞發生病理改變，胞內顆粒增多、增粗，后變圓脫落死亡。

出現“小黑點"特殊情況

原蟲為單細胞真核動物，在自然界分布廣泛，種類繁多，約有近萬種為寄生性原蟲，生活在動物體內或體表。

細胞實驗中細胞受到原蟲污染后，培養基輕微渾濁，鏡下可以觀察到眾多的細小點狀物，輕微活動。細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態不好，邊緣不清楚，細胞不透亮，在光鏡下觀察常可見到細胞核及胞漿內

出現大小不等的顆粒或空泡。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養，但在污染初期原蟲的數量少，細胞還能占據優勢，

所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環。（對于原蟲的定義，

業內仍然存在一定的討論空間，也有研究者認為原蟲污染屬于細菌類污染）

螨蟲

螨蟲屬于節肢動物門蛛形綱廣腹亞綱的一類體型微小的動物，身體大小一般都在0.5毫米左右，有些小到0.1毫米，大多數種類小于1毫米。世界上已發現螨蟲（mite）有50000多種，僅次于昆蟲。螨蟲污染在細胞系培養中十分少見，

常見于原代培養皮膚成纖維細胞時，形態呈桿狀，能自主直線游動，速度相當快，常常源自實驗動物的毛發中。