qPCR的內(nèi)參，你選對了嗎

什么是內(nèi)參基因？

內(nèi)參基因，也稱為管家基因，即是內(nèi)部參照，它們在各組織和細(xì)胞中的表達(dá)相對恒定，在檢測基因的表達(dá)水平變化時(shí)常用它來做參照物。所以叫內(nèi)參基因。其作用是校正上樣量、上樣過程中存在的實(shí)驗(yàn)誤差，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。借助檢測每個(gè)樣品內(nèi)參的量就可以用于校正上樣誤差，這樣半定量的結(jié)果才更為可信。一般要選擇一個(gè)在處理因素作用的條件下不會發(fā)生表達(dá)改變的基因作內(nèi)參。常用的內(nèi)參基因包括GAPDH、β-actin、18 sRNA、28sRNA、B2M、ACTB、SDHA、HPRT1、ARBP內(nèi)參基因等。

在相對定量檢測中，最重要的是選擇合適的內(nèi)參基因；而選擇合適的內(nèi)參基因中，最重要的，則是實(shí)驗(yàn)內(nèi)參基因在不同處理間的表達(dá)穩(wěn)定性。選擇合適的內(nèi)參，是相對定量成功的開端！