T25瓶細胞處理的方法

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養瓶是否完好。 如有破損漏液等問題，請即時聯系。

并進行以下操作：

 1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養瓶外部。 

2. 將細胞放入37度培養箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩定細胞狀態。

 3. 預熱培養基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

 4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

 5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養基。放到37度培養箱培養。待細胞密度達到80%以上，進行傳代 

②若細胞密度較大，達到80%以上，將細胞傳代培養。 注：培養瓶里的培養基血清濃度為5%，建議更換成自己配好的新鮮培養基。由于運輸過程中的問題，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況。 這時請在拍照后將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的培養基到新的培養皿/瓶繼續培養3天；同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的培養基。（這里是針對原來培養基FBS濃度是10%的情況，如果原來FBS濃度是20%，可以增加到25%FBS濃度）