
懸浮細胞和貼壁細胞復蘇操作大不同細節決定細胞存活率
貼壁細胞復蘇核心流程
1、快速解凍:凍存管37度水浴1分鐘內wan全融化,避免DMSO損傷細胞
2、離心清洗:轉移至含培養基的離心管,1000rpm離心5分鐘,棄上清去除凍存液
3、重懸貼壁:用預熱培養基重懸,接種至培養瓶,搖勻后靜置培養,24小時后觀察貼壁情況
懸浮細胞復蘇更靈活
1、直接復蘇法:解凍后可直接將細胞懸液加入新鮮培養基,無需離心(敏感細胞建議使用離心法,避免DMSO對細胞的損傷
2、離心法:若需換液,低速離心(300-800rpm)后重懸,避免機械損傷
貼壁VS懸浮復蘇差異
貼壁細胞:必需離心去除凍存液,依賴貼壁生長,復蘇后恢復期長
懸浮細胞:可免離心直接培養,恢復快但需維持密度,避免頻繁觀察(敏感細胞仍建議使用離心法,避免DMSO對細胞的損傷)
無論哪種細胸,快速解凍、無菌操作和培養基預熱都是關鍵

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